补肾益精法对系统性硬皮病血管内皮间质转化的影响

摘要：

目的:探讨补肾益精法中药复方对系统性硬皮病血管内皮细胞内皮间质转化(endothelial tomesenchymal transition,EndMT)的影响及机制.方法:采用博莱霉素建立硬皮病小鼠模型,造模同时补肾益精方软皮汤2号方(中药复方)进行干预,4周后HE染色观察小鼠皮肤组织病理、免疫组化法检测α-SMA表达水平;体外构建TGF-β1诱导的血管内皮细胞EndMT模型,用补肾益精法含药血清处理48 h后,采用细胞免疫荧光方法检测血管内皮细胞α-SMA表达,Western Blot方法检测血管内皮细胞CD31、FSP1、Snail-1表达水平.结果:HE染色结果显示,模型组小鼠皮肤纤维化区域中,胶原纤维明显增多、胶原间隙变窄、毛细血管明显少于正常皮肤组织;与模型组比较,中药复方组小鼠皮肤胶原纤维较少、间隙较宽、血管数量较多;免疫组化染色检测结果显示,模型组小鼠皮肤组织中血管内皮细胞α-SMA表达高于正常对照组,中药复方组α-SMA阳性表达明显减少.免疫荧光检测结果显示,经TrGF-β1诱导成功建立EndMT模型,EndMT模型组细胞αt-SMA高表达,内皮细胞发生间质转化,经含药血清处理后,α-SMA表达明显减少.Western Blot检测结果显示,EndMT模型组中Snail-1、FSP1均明显高于对照血清组,CD31明显低于对照血清组;含药血清处理组Snail-1、FSP1表达明显低于EndMT模型组,CD31表达高于EndMT模型组(P＜0.05).结论:补肾益精法对系统性硬皮病血管的保护作用,可能与通过某些途径拮抗Snail介导的EndMT所参与的纤维增生性闭塞性血管损伤有关.

关键词：系统性硬皮病、血管内皮细胞、补肾益精法、血管内皮间质转化

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资助基金：国家自然科学基金资助项目81573976;广东省自然科学基金资助项目2015A030313341;广东省科学技术厅项目2014A020221029;广州中医药大学青年英才基金项目20120103

在线出版日期：2017-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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