基于斑马鱼和EA.hy926细胞模型评价活血化瘀方的促血管新生作用

摘要：

目的:评价活血化瘀方(SE)的促血管新生作用,并探讨其可能的作用机制.方法:选择转基因斑马鱼幼鱼及内皮细胞系EA.hy926细胞株为模型,按空白对照组、模型组、活血化瘀方不同剂量组进行分组和给药干预.在荧光显微镜下观察正常斑马鱼胚胎培养液中空白对照组及活血化瘀方组肠下静脉血管(SIVs)的生长状况;用VEGF受体抑制剂(VRI)诱导斑马鱼血管损伤,观察各组斑马鱼节间血管(ISVs)生长情况;采用VRI抑制内皮细胞系EA.hy926增殖模型,用MTT法评价活血化瘀方各组对细胞增殖的促进作用;用Real-time PCR法,检测各组斑马鱼体内血管内皮生长因子受体(VEGFR)基因(flt1 、kdr、kdrl)的表达情况.结果:在正常斑马鱼模型上,活血化瘀方可明显促进斑马鱼SIVs出芽;在VRI诱导的斑马鱼血管损伤模型上,活血化瘀方各剂量组能够明显抑制斑马鱼ISVs的损伤,其血管生长指数与模型组比较差异均有统计学意义(P＜0.001);在EA.hy926细胞模型上,活血化瘀方各剂量组可明显促进内皮细胞的增殖.Real-time PCR结果表明,模型组VRI显著抑制了斑马鱼体内VEGF受体基因flt1、 kdr、 kdrl的表达,而活血化瘀方各剂量组的表达量均明显增高,并呈现一定的剂量依赖关系.结论:活血化瘀方在内皮细胞模型、正常斑马鱼模型和VRI诱导的斑马鱼血管损伤模型上均具有促血管新生作用,其机制可能与其上调VEGF受体flt1、kdr、kdrl基因的表达有关.

关键词：活血化瘀方、血管新生、斑马鱼、内皮细胞、VEGF受体

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资助基金：国家自然科学基金海外及港澳学者合作项目81328025;上海市自然科学基金项目13ZR1442400;上海市卫计委科研基金项目20154Y0052;上海中医药大学预算内项目2014YSN31

在线出版日期：2016-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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