无形体分泌蛋白Ats-1与宿主细胞互作蛋白筛选及其生物信息分析

摘要：

目的 筛选与无形体Ats-1互作的THP-1宿主细胞蛋白,为揭示病原体侵袭宿主的致病机理提供科学数据.方法 利用分子克隆法构建pGBKT7-ats-1诱饵质粒并转化酵母Y2HGold,验证诱饵质粒是否有自激活、毒性现象;制备THP-1细胞cDNA并连接到pGADT7-Rec上,转化酵母Y187并鉴定cDNA文库质量;酵母双杂交筛选与Ats-1互作的宿主细胞靶蛋白,通过GO、String生物信息分析细胞靶蛋白可能的生物学过程.结果 成功构建诱饵质粒;cDNA文库容量4×106克隆,插入片段100～3000 bp,且无污染,达到建库质控要求;酵母双杂交结果显示,与Ats-1蛋白互作的宿主细胞靶蛋白7个,分别是真核延伸因子1复合体α1亚基(EEF1A1)、TIMP金属蛋白酶抑制子1(TIMP1)、锌指蛋白36,C3H样2(ZFP36L2)、半乳糖凝集素1(LGALS1)、前胸腺素α(PTMA)、WBSCR22、吸引素(ATRN).生物信息分析显示,与Ats-1互作的宿主靶蛋白主要参与细胞分化增殖、细胞凋亡、自噬、炎症等生物学过程.结论 病原诱饵蛋白与宿主细胞靶蛋白互作是一种细胞-细胞间发生信号联系的分子水平生物学过程,可能影响病原粘附、侵袭及胞内生存,最终导致疾病发生及临床症状出现.

关键词：无形体、Ats-1蛋白、酵母双杂交、宿主靶蛋白、生物信息分析

所属期刊栏目：38

分类号：R384.4(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金项目;石河子大学科研项目

在线出版日期：2020-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：179-185