陆地棉(Gossypium hirsutum L.)GhWRKY75的克隆及表达载体构建

摘要：

目的 从棉花抗病品种中克隆WKKY转录因子基因,为棉花抗枯萎病分子育种提供重要的基因资源.方法 以枯萎病菌诱导后棉花基因表达谱中差异表达的WRKY基因片段为探针序列,以陆地棉的抗枯萎病品种'中棉所12'的根部cDNA为模板.运用电子拼接及RT-PCR技术,克隆得到一个新的基因,将该基因命名为Gh WRKY75(登录号:MH138002).结果 序列分析发现,GhWRKY75基因开放阅读框全长为513bp,编码一个含170个氨基酸残基的蛋白,具有1个WRKY结构域及1个典型的C2H2型锌指结构,属于第Ⅱ类WRKY转录因子家族.该基因编码蛋白分子量为19.51kd,等电点为9.30,脂肪指数为60.12,属于疏水性蛋白,基因的蛋白二级结构由α螺旋、延伸链和无规则卷曲组成.同源基因进化树分析表明该基因与雷蒙德氏棉亲缘关系最近.结论:从棉花中克隆得到一个新的GhWRKY75基因,构建了该基因的植物过表达载体,为进一步研究该基因功能奠定了基础.

关键词：陆地棉、基因克隆、WRKY转录因子、载体构建

所属期刊栏目：36

分类号：S562(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金项目31260358

在线出版日期：2018-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：330-336