布鲁菌感染细胞NF-κB的表达水平检测及其干扰方法研究

摘要：

目的 本文针对布鲁氏菌侵染宿主细胞过程中NF-κB的表达进行检测,并比较siRNA和shRNA对RAW264.7细胞中NF-κB表达沉默效果.方法 根据NF-κB P65基因序列,设计siRNA干扰序列,通过干扰RAW264.7细胞筛选效率较高的siRNA设计shRNA序列,siRNA和shRNA同时干扰布鲁氏菌侵染的RAW264.7细胞,使用RT-PCR方法检测NF-κB P65基因的相对表达情况.结果 与阴性对照mock组相比,P65-shRNA组表达降低;P65-siRNA组P65表达低于P65-shRNA组,均低于阴性对照mock组;布鲁氏菌侵染组,P65表达显著高于阴性对照组.结论 布鲁氏菌侵染组促进了NF-κB P65的表达,P65-shRNA、P65-siRNA组均抑制了NF-κB P65的表达,siRNA可作为基因沉默中快速筛选的工具,在RNA干扰的应用中可与shRNA配合使用.

关键词：布鲁氏菌、siRNA、shRNA、NF-κB

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分类号：S939.34(水产资源)

资助基金：新疆兵团国际科技合作项目GJHZ201709;新疆兵团优青计划CZ027202;国家大学生SRP项目201710759011

在线出版日期：2018-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：315-320