10.13880/j.cnki.65-1174/n.2016.05.009
LPA对人结肠腺癌Caco2细胞SLC26A3表达的影响
为探讨溶血磷脂酸(LPA)对溶质载体26 A3(solute carrier 26 A3'SLC26A3或DRA)在Caco2细胞中细胞内定位及蛋白表达的影响.采用构建pIRES2-ZsGreen1-SLC26A3质粒,转染Caco2细胞,G418筛选获稳转pIRES2-ZsGreen1-SLC26A3 Caco2细胞.设立未处理的Caco2细胞组(Caco2组)、转染空质粒的Caco2组(NP-Caco2组)、转染SLC26A3质粒的Caco2组(SLC26A3-Caco2组)、LPA处理的转染空质粒的Caco2组(LPA+NP-Caco2组)和LPA处理的转染SLC26A3质粒的Caco2组(LPA+SLC26A3-Caco2组),以LPA与Caco2细胞共孵育12 h为观察时间点(LPA浓度为100μmoL/L),利用细胞免疫荧光实验观察Caco2细胞中SLC26A3的定位分布,Western blot法检测Caco2细胞中SLC26A3蛋白的表达.结果显示,细胞免疫荧光实验观察结果显示LPA+SLC26A3-Caco2组SLC26A3细胞膜定位较SLC26A3-Caco2组的略有增加;Western blot检测结果显示LPA+NP-Caco2组的糖基化SLC26A3蛋白表达量较Caco2组与NP-Caco2组的均增加,有统计学意义(相对β-actin的表达量,LPA+NP-Caco2组vs.Caco2组:0.83±0.446 vs.0.14±0.050,P=0.018;LPA+NP-Caco2组vs.NP-Caco2组:0.83±0.446 vs.0.29±0.032,P=0.044).由此可知,LPA可促进SLC26A3在Caco2细胞的细胞膜定位和蛋白表达,从而为LPA作为治疗结肠炎相关性腹泻的候选药物提供更多理论依据.
溶血磷脂酸、溶质载体26 A3、Caco2
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R574.62(消化系及腹部疾病)
石河子大学高层次人才科研启动项目RCZX201443
2017-03-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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577-582