genP基因在依纽小单孢菌中表达的分析

摘要：

庆大霉素生物合成过程中的genP基因和西索米星生物合成过程中的sisⅠ基因属同工异源酶基因,均能催化绛红糖胺3’,4’-双脱羟基反应.本研究借助组合生物合成,探索绛红小单孢菌中的genP基因能否在依纽小单孢菌中表达.首先构建genP基因替换sisⅠ基因的同源重组质粒pKPI4,并经接合转移将其导入依纽小单孢菌TS388中,最后再通过影印筛选及PCR鉴定获得genP基因替换sisⅠ基因的工程菌PTI886.将野生型菌株TS388、sisⅠ基因缺失突变株TII1 102(TS388△sisⅠ)及工程菌PTI886在同等条件下进行发酵,提取其代谢产物并经薄层层析及质谱分析.结果表明,突变株TII1 102不能合成西索米星,而工程菌PTI886仍能继续合成西索米星,且代谢产物组分与野生型菌株TS388相比无明显变化,说明genP基因能在依纽小单孢菌中表达.本研究揭示了同工异源酶基因异源表达的可行性,可为今后不同微生物异源基因组合的研究提供借鉴.

关键词：组合生物合成、genP基因、sisⅠ基因、异源表达、3’、4’-双脱羟基

所属期刊栏目：34

分类号：Q933;Q786(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31070093

在线出版日期：2017-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：558-564