布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0339基因的原核表达及免疫反应性分析

摘要：

本研究对布鲁氏菌分泌蛋白BMEI0339进行了表达纯化、免疫反应性分析,并研究了该蛋白对胚胎滋养层细胞(HPT-8)的细胞因子表达的影响.首先从羊种布鲁氏菌(B.melitensis)标准株16M的基因组中克隆BMEI0339基因片段,亚克隆至融合表达载体pET-28a,构建表达重组质粒pET-28a-BMEI0339,并利用大肠杆菌进行表达.Western blotting方法检测其免疫学特性;用纯化的重组蛋白感染细胞,并检测IL-1 、IL-10和TNF-α表达量.结果显示:成功构建了pET-28a-BMEI0339原核表达载体,并在大肠杆菌中成功表达了BMEI0339蛋白,Western blotting检测其具有免疫反应性,该蛋白作用细胞后发现TNF-α的表达量低于BSA对照组,差异极显著(P＜0.01);IL-1和IL-10的表达量差异不显著(P＞0.05).本研究成功表达了布鲁氏菌分泌蛋白BMEI0339,证实其具有一定的免疫原性,表明该蛋白影响了胚胎滋养层细胞TNF-α的表达.本研究为研究布鲁氏菌感染宿主细胞的致病机理提供理论基础.

关键词：布鲁氏菌、BMEI0339、原核表达、细胞因子、胚胎滋养层细胞

所属期刊栏目：33

分类号：S852.5;R516.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31460650

在线出版日期：2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：716-720