中国美利奴羊BMP4基因的克隆、序列分析与真核表达

摘要：

本实验利用RT-PCR技术获得妊娠105 d胎羊皮肤组织cDNA,PCR扩增获得中国美利奴羊BMP4基因全长编码区序列(CDS),将其克隆到zero PCR@TM-Blunt载体进行测序验证.获得的BMP4基因亚克隆至pcDNA3.1载体,构建绵羊BMP4真核表达载体,经脂质体2000转染293T细胞进行BMP4重组蛋白表达,Western blot鉴定表达产物.结果表明:中国美利奴羊BMP4基因编码区包含1227 bp,编码409个氨基酸,与其它哺乳动物氨基酸相似性达到92％,其成熟肽羧基末端区域具有TGFβ家族保守区结构.Western blot结果显示,重组蛋白分子量约为47KD,与预期一致,并证实人源BMP4单克隆抗体能够应用于羊BMP4研究.这为进一步的研究奠定了必要基础.

关键词：BMP4基因、中国美利奴羊、序列分析、真核表达

所属期刊栏目：32

分类号：S826(家畜)

资助基金：国家“863”计划项目2013AA102506

在线出版日期：2015-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：698-704