10.3969/j.issn.1007-7383.2014.04.002
马铃薯Y病毒辅助成分蛋白酶与加工番茄OPA3-like蛋白结合及其定位研究
为了研究加工番茄OPA3-1ike蛋白与马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的辅助成分蛋白酶(helper component proteinase,HC-Pro)的相互作用,进行了2种蛋白的结合及其定位研究.通过PCR的方法从加工番茄中克隆OPA3-1ike 基因,同时利用Blast方法对其分析,进行了OPA3-1ike蛋白基因氨基酸序列同源性分析.通过构建双分子荧光互补载体pSPYCE-35S-OPA3-like和pSPYNE-35S-HC-Pro,利用农杆菌介导法共侵染洋葱表皮细胞60 h后,在共聚焦显微镜下观察洋葱表皮细胞中的黄色荧光.结果显示:加工番茄OPA3-like基因ORF长510 bp,编码169个氨基酸,编码蛋白属OPA3蛋白家族.激光共聚焦显微镜下可观察到沿细胞膜呈小泡状分布黄色荧光,说明PVY的HC-Pro蛋白与加工番茄OPA3-like蛋白结合并且共定位在细胞膜附近.这为进一步研究PVY的HC-Pro蛋白与加工番茄OPA3-like蛋白的相互作用机制奠定了一定的基础.
HC-Pro蛋白、OPA3-like蛋白、相互作用、双分子荧光互补、洋葱表皮细胞
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S435.32;S641.2(病虫害及其防治)
国际科技合作专项2008DFA30560
2015-01-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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