10.3969/j.issn.1007-7383.2014.02.003
PMA-qPCR快速检测结核活菌方法的建立
为建立快速鉴别诊断结核活/死菌的方法,本研究应用PMA染料与实时定量PCR技术结合(PMA-qPCR),以结核标准株16 sRNA基因为靶基因,PMA对样品基因组提取物进行处理,PMA能够与死细胞DNA分子共价交联并抑制DNA分子扩增。结果显示:PMA浓度在3μg/mL,曝光时间大于15 min时,PMA既不影响活菌的的扩增,又能有效抑制死菌的扩增;当PMA浓度大于20μg/mL时,PMA影响活菌DNA的扩增;PMA-qPCR技术能够定量不同比例的结核活/死菌悬液中的活菌。结论:PMA-qPCR技术能够快速准确检测出结核杆菌中的活细胞。
叠氮溴化丙锭(PMA)、PMA-qPCR技术、活/死菌
R446.5(诊断学)
卫生部“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项2013ZX10003003;国家自然科学基金项目31060333
2014-06-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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