猪α干扰素在BHK-21细胞中的表达与生物活性分析

摘要：

为了构建猪α-干扰素(PoIFN-α)的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1(+)载体,并转染BHK-21细胞.通过G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用real-time PCR及ELISA测定PoIFN-α基因在BHK-21细胞内的表达,利用淋巴细胞增值试验(MTT)检测表达蛋白的生物学活性.结果表明:稳定整合PoIFN-α基因的BHK-21细胞系其PoIFN-α mRNA的转录效率比阴性对照组提高1.52倍,蛋白表达量显著提高1.35倍.MTT试验表明真核表达PoIFN-α淋巴细胞增值活性与阴性对照组相比差异显著(P＜0.01),表明BHK-21细胞表达的PoIFN-α具有良好的生物学活性,为开发新型抗病毒制剂奠定基础.

关键词：猪α干扰素、BHK-21细胞、生物活性分析

所属期刊栏目：31

分类号：S852.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31260534;国家青年科学基金项目31201800

在线出版日期：2013-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：182-186