10.3969/j.issn.1007-7383.2012.04.006
库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi载体构建及烟草遗传转化
为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377 bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354 bp(PCR-CLB)作为靶标基因.以植物表达载体pBi35SG12为骨架载体,卡那霉素抗性基因为筛选基因,将靶标基因的正向序列和反向重复序列分别插入到内含子(intron)的两侧,构建RNAi载体pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,利用农杆菌介导的方法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),通过对各载体的干扰效果评价来分析各基因的主要功能.通过PCR检测pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,结果表明已分别获得27株和24株转基因植株.本研究为进一步评价各载体的干扰效果和研究ACLSV主要基因的功能奠定了基础.
苹果褪绿叶斑病毒、克隆、RNAi载体、遗传转化
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S436.612.1;S432.41(病虫害及其防治)
国家自然科学基金项目30860168
2013-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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422-428