库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi载体构建及烟草遗传转化

摘要：

为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377 bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354 bp(PCR-CLB)作为靶标基因.以植物表达载体pBi35SG12为骨架载体,卡那霉素抗性基因为筛选基因,将靶标基因的正向序列和反向重复序列分别插入到内含子(intron)的两侧,构建RNAi载体pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,利用农杆菌介导的方法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),通过对各载体的干扰效果评价来分析各基因的主要功能.通过PCR检测pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,结果表明已分别获得27株和24株转基因植株.本研究为进一步评价各载体的干扰效果和研究ACLSV主要基因的功能奠定了基础.

关键词：苹果褪绿叶斑病毒、克隆、RNAi载体、遗传转化

所属期刊栏目：30

分类号：S436.612.1;S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金项目30860168

在线出版日期：2013-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：422-428