10.3969/j.issn.1007-7383.2008.06.010
兔IL-15蛋白在毕赤酵母中的表达及其免疫学活性
用特异性引物扩增出兔IL-15基因片段,用KpnI和NotI双酶切后将其定向克隆到pPICZαA中,构建出重组质粒pPICZαAIL-15.将pPICZαAIL-15用SacI内切酶线性化后,电转化感受态GS115酵母细胞,用PCR法筛选阳性重组子.用1.5%的甲醇诱导重组酵母菌,取培养物上清进行重组蛋白的检测.结果SDS-PAGE电泳可在重组酵母菌培养物上清中检测到分子量为18.6kDa大小的重组蛋白.凝胶薄层扫描分析表明,3株重组酵母菌在1.5%甲醇诱导144h后,重组IL-15表达量约占培养物上清总蛋白量的6.1%~8.6%.将重组IL-15用Ni离子亲和层析纯化后,在MTT试验中表现出明显的促进淋巴细胞的增殖反应,证实表达的重组IL-15具有天然蛋白的免疫学活性.
兔IL-15基因、毕赤酵母、表达、免疫学活性
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S829.12(家畜)
新疆兵团博士基金项目2008JC08
2009-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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