流式细胞术鉴定结核分枝杆菌利福平异质性耐药可行性分析

摘要：

目的 探讨流式细胞术(FCM)检测结核分枝杆菌(MTB)利福平(RFP)异质性耐药的可行性.方法 将MTB临床分离株分别用12.5、25、50和100μg/mL RFP处理3、7和10 d后,用荧光素双醋酸酯(FDA)染色,采用FCM检测其平均荧光强度(MFI),计算敏感指数(实验管MFI/对照管MFI),并进行差异性分析.确定不影响RFP耐药MTB临床分离株生长、但抑制RFP敏感MTB临床分离株生长的RFP处理浓度和时间.将30株RFP敏感MTB临床分离株和30株RFP耐药MTB临床分离株菌液混合,得到RFP耐药MTB所占比例分别为0％、25％、50％、75％和100％的RFP异质性耐药MTB菌液,按照确定的RFP浓度和时间处理,计算FDA染色后的敏感指数.采用受试者工作特征(ROC)曲线评估不同比例RFP异质性耐药MTB菌液的敏感指数界值和检测性能.结果 基于FDA的FCM检测MTB RFP异质性耐药的较优RFP处理浓度为50μg/mL,作用时间为10 d;用50μg/mL RFP处理MTB 10 d时,基于FDA的FCM鉴别含0％、25％和100％的RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.48和0.83,敏感性分别为96.2％和86.7％,特异性分别为96.7％和83.3％;处理14 d时,该方法鉴别含0％、25％和100％RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.37和0.77,敏感性分别为96.7％和96.7％,特异性分别为93.3％和86.7％.结论 FCM在MTB异质性耐药检测中具有较高的应用价值.

关键词：流式细胞术、结核分枝杆菌、利福平异质性耐药、荧光素双醋酸酯

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分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：国家科技重大专项;广东省自然科学基金;广东省自然科学基金;广州市高水平临床重点专科;培育专科建设项目;广州市医学重点学科结核病学建设项目

在线出版日期：2022-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：577-582