脂毒性应激对Bcl-2蛋白诱导胰岛β细胞凋亡的调节作用

摘要：

目的 探讨脂毒性应激对B淋巴细胞瘤(Bcl)-2蛋白诱导胰岛β细胞凋亡的调节作用.方法 利用C57BL/6小鼠构建PUMA-/-小鼠,喂食高脂肪饮食72 h后处死并分离胰岛.分别用棕榈酸酯、蛋白酶体抑制剂MG132处理小鼠胰岛瘤MIN6细胞0、2、4、8、24 h,分别用萝卜硫烷(SFN)、棕榈酸酯、SFN+棕榈酸酯处理小鼠胰岛β细胞0、2、4、8、24 h.以用二甲基亚砜处理相同时间的MIN6细胞和β细胞作为对照.检测细胞蛋白酶体活性,活化转录因子4(ATF4)mRNA、重链结合蛋白(Bip)mRNA、C/EBP同源蛋白(Chop)mRNA、p53上调凋亡调控因子(PUMA)mRNA表达量,Bcl-2、Bcl-XL、Mcl-1和Akt蛋白表达量,同时评估细胞活性.结果 与0 h比较,采用棕榈酸酯处理MIN6细胞不同时间的蛋白酶体活性均无明显变化(P>0.05);采用MG132处理MIN6细胞8 h的蛋白酶体活性显著降低(P<0.05);MG132处理MIN6细胞24 h的Ub水平显著升高(P<0.05).棕榈酸酯组和MG132组处理24 h后,MIN6细胞凋亡数显著高于对照组(P<0.05),棕榈酸酯和MG132处理24 h后,MIN6细胞ATF4 mRNA、Bip mRNA、Chop mRNA、PUMA mRNA表达量高于0 h(P<0.05).棕榈酸酯和MG132处理24 h后,MIN6细胞Bcl-2、Bcl-XL、Akt蛋白水平显著低于0 h(P<0.05);Mcl-1蛋白水平呈先升后降趋势,棕榈酸处理2 h时Mcl-1蛋白水平最高,MG132处理8 h时Mcl-1水平最高.棕榈酸酯组β细胞凋亡率均显著高于SFN组、SFN+棕榈酸酯组和对照组(P<0.05),SFN组、SFN+棕榈酸酯组及对照组之间β细胞凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05).棕榈酸酯组AFT4蛋白、Chop蛋白、Bip蛋白和PUMA mRNA水平均显著高于对照组(P<0.05);而SFN+棕榈酸酯组与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05).结论 靶向泛素-蛋白酶体系统(UPS)和Bcl-2蛋白表达能有效预防胰岛β细胞凋亡.

关键词：B淋巴细胞瘤-2蛋白、β细胞、细胞凋亡、脂毒性应激、泛素化蛋白

所属期刊栏目：37

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：广东省自然科学基金2017A030310005

在线出版日期：2022-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：274-280