10.3969/j.issn.1673-8640.2019.12.001
串联质谱技术在X-连锁肾上腺脑白质营养不良病筛查中的应用价值
目的 建立串联质谱(MS/MS)检测极长链酰基肉碱(VLCAC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)的方法,初步探讨VLCAC和LPC对X-连锁肾上腺脑白质营养不良病(X-ALD)的诊断价值.方法 选取被明确诊断为X-ALD的患儿10例和行遗传代谢性疾病筛查的正常新生儿3530名.收集所有对象的滤纸干血片样本,使用含稳定同位素内标[2H3-二十六碳酰基肉碱(2H3-C26)和2H4-二十六碳溶血磷脂酰胆碱(2H4-C26:0-LPC)]的溶剂萃取滤纸干血片样本中的VLCAC和LPC(非衍生化法),直接采用MS/MS检测二十碳酰基肉碱(C20)、二十二碳酰基肉碱(C22)、二十四碳酰基肉碱(C24)、二十六碳酰基肉碱(C26)、二十碳溶血磷脂酰胆碱(C20:0-LPC)、二十二碳溶血磷脂酰胆碱(C22:0-LPC)、二十四碳溶血磷脂酰胆碱(C24:0-LPC)和二十六碳溶血磷脂酰胆碱(C26:0-LPC).对建立的MS/MS方法进行方法学评价(精密度、准确度、线性).采用偏最小二乘法分析各项指标对疾病的贡献度.采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断X-ALD的效能.结果 低水平C26和C26:0-LPC的批内变异系数(CV)分别为4.16%和7.75%,批间CV分别为8.29%和9.17%;高水平C26和C26:0-LPC的批内CV分别为5.57%和8.68%,批间CV分别为7.45%和8.11%.准确度为93.25%~104.94%.C26和C26:0-LPC实测值与预测值之间的决定系数(r2)分别为0.996和0.994.除C20、C24:0-LPC/C20:0-LPC、C24:0-LPC/C22:0-LPC、C26:0-LPC/C20:0-LPC外,其他指标正常对照组与X-ALD组差异均有统计学意义(P<0.05).C26、C26/C22比值和C26:0-LPC对疾病的贡献度最高(偏回归系数分别为0.1753、0.1300和0.0792).ROC曲线分析结果显示,C26和C26/C22比值诊断X-ALD的敏感性均为100%,特异性均为100%,曲线下面积(AUC)均为1.0;C26:0-LPC诊断X-ALD的敏感性为100%,特异性为72.9%,AUC为0.972.结论 非衍生化MS/MS检测VLCAC和LPC有较高的精密度和准确度,C26或可作为诊断X-ALD的生物标志物.
极长链酰基肉碱、溶血磷脂酰胆碱、串联质谱、X-连锁肾上腺脑白质营养不良病
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R446.1(诊断学)
上海市科学技术委员会科研项目18441905100;上海市重中之重临床重点专科建设项目2017ZZ02019;上海市第四轮公共卫生三年行动计划重点学科建设项目15GWZK0401;上海交通大学多学科交叉项目YG2015QN27
2020-01-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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