3种血浆微小RNA提取方法的评价

摘要：

目的 对3种血浆微小RNA(miRNA)提取方法进行评价.方法 运用国产、进口硅胶吸附柱法和TRIzol法分别提取20名志愿者血浆中的miRNA;利用TaqMan聚合酶链反应(PCR)检测提取物中的β-globin基因含量,观察提取物中RNA的纯度;利用反转录茎环引物及TaqMan-MGB探针qPCR检测提取物中miRNA-21含量,观察miRNA提取的效率.结果 国产、进口硅胶吸附柱法及TRIzol法提取液中β-globin基因的Ct值分别为35.487±0.356、35.591±0.332和33.529±0.499,3种方法的Ct值差异有统计学意义(P<0.001);国产和进口硅胶吸附柱方法的β-globin基因Ct值均明显高于TRIzol法(P<0.0001);而国产与进口硅胶吸附柱法β-globin基因Ct值差异无统计学意义(P=0.3454).国产、进口硅胶吸附柱法和TRIzol法miRNA-21的Ct值分别为26.527±0.158、26.653±0.201和28.169±0.385,3种方法的Ct值差异有统计学意义(P=0.0003);国产和进口硅胶吸附柱法miRNA-21的Ct值均明显低于TRIzol法(P<0.0001);国产硅胶吸附柱法miRNA-21的Ct值低于进口硅胶吸附柱法(P=0.0337).结论 硅胶吸附柱法可有效提高miRNA的提取效率和纯度.国产硅胶吸附柱法完全可以取代进口硅胶吸附柱法.

关键词：微小RNA、核酸提取、硅胶吸附柱、TRIzol法、TaqMan聚合酶链反应

所属期刊栏目：33

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：上海市卫生和计划生育委员会面上项目201540235

在线出版日期：2018-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：335-338