荧光恒温扩增技术检测单纯疱疹病毒Ⅰ型 RNA 方法的建立

摘要：

目的：利用荧光恒温扩增技术（SAT）建立一种快速、可靠的单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）检测方法。方法根据 Genbank 上获取 HSV-1开放读码框 Us5区域的 RNA 序列设计扩增引物及优化探针，使用 M-MLV反转录酶及 T7 RNA 多聚酶对 HSV-1 RNA 进行核酸扩增，同时利用荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪进行实时荧光信号收集和检测。收集儿童病毒性脑炎或疑似患儿样本212份（脑脊液样本150份、血浆样本62份），以巢式 PCR +测序为参比方法，对 SAT 结果进行 Kappa 一致性分析。结果SAT 检测 HSV-1 RNA 的灵敏度为100拷贝/μL，采用 SAT 检测212份临床样本，共检测出18例 HSV-1阳性样本，巢式 PCR 检出16例阳性，经测序证实其中12例为阳性结果。SAT 与巢式 PCR+测序方法的 Kappa 值为0.785，其敏感性为100.0%、特异性为97.0%。结论建立的 SAT 检测脑脊液和血浆中 HSV-1 RNA 的方法具有敏感性高、特异性强、准确、快速、可靠的优点，适用于临床对单纯疱疹病毒性脑炎早期的快速诊断。

关键词：单纯疱疹病毒I型、荧光恒温扩增技术、单纯疱疹性脑炎、特异性、敏感性

所属期刊栏目：31

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：上海市公共卫生优秀学科带头人计划GWDTT201221

在线出版日期：2016-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：163-167