不同处理方法对流式细胞术检测外周血单核细胞-血小板聚集体的影响

摘要：

目的：探讨实际工作中不同处理方法对流式细胞术检测单核细胞-血小板聚集体（ MPA）的影响，为准确检测MPA提供依据。方法获取枸橼酸钠抗凝外周静脉全血，分别以CD14-藻红蛋白（ PE）、CD61-异硫氰酸荧光素（ FITC）标记单核细胞、血小板，以CD62P-PE标记活化血小板，使用流式细胞术检测CD14-PE／CD61-FITC双阳性MPA占单核细胞百分比及血小板CD62P阳性率。采用不同处理方法[全血标本处理前后放置不同时间、全血固定后立即标记抗体或放置不同时间后标记抗体、抗体标记前全血离心处理、不同抗体组合（抗CD14-PE和抗CD61-FITC ，抗CD14-PE和抗CD41-ECD，抗CD45-ECD和抗CD61-FITC）]检测MPA，比较各种处理方法检测的MPA是否有差异。结果与获取标本后立即处理比较，放置于室温（18～25℃）和低温（2～8℃）， MPA百分比、血小板CD62P阳性率均随放置时间的延长而增加（P＜0．05），两者呈正相关（室温r＝0．82，P＜0．05；低温r＝0．83，P＜0．05）。标本处理后立即检测或低温保存放置至24 h再检测， MPA百分率差异无统计学意义（P＞0．05）。与固定前标记抗体的处理方法比较，1％多聚甲醛低温固定全血标本后标记抗体，或者低温保存放置至24 h再标记抗体，MPA百分率差异无统计学意义（P＞0．05）。全血标本离心处理后，MPA百分率和血小板CD62P阳性率均明显增加（P＜0．05）。不同的抗体组合检测MPA百分比的差异均无统计学意义（P均＞0．05）。结论获取全血标本后应尽快处理，不能立即处理的应使用固定剂固定后可低温保存24 h。在标记新鲜全血标本前，应避免离心，处理完毕的标本使用固定剂固定后可低温保存24 h再用流式细胞术检测。不同抗体组合应验证后使用，CD14／CD61、CD14／CD41、CD45／CD61组合均适用于检测MPA。

关键词：单核细胞-血小板聚集体、流式细胞术、处理方法

分类号：R446.11(诊断学)

资助基金：湖北省卫生厅科研一般项目JX5 B47

在线出版日期：2015-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：916-920