HPLC－MS/MS 同位素稀释法测定人体血清中类固醇激素的研究

摘要：

目的：建立一种能同时测定血清中多种类固醇激素[包括脱氢表雄酮（ DHEA）、17α－羟孕酮（17α－OHP4）、雄烯二酮（AD）、雌酮（E1）、皮质酮（CORT）、双氢睾酮（DHT）、孕烯醇酮（P5）和17－羟孕烯醇酮（17－OHP5）]的快速、灵敏的稳定同位素稀释高效液相色谱串联质谱（ID－HPLC－MS／MS）方法。方法血清样品经甲基叔丁基醚（MTBE）提取，上清液吹干后加入羟胺进行柱前衍生化反应后检测。采用 Phenomenex C18反相色谱柱和 Phenomenex C18预保护柱。流动相 A 为含0．1％甲酸的水，流动相 B 为含0．1％甲酸的甲醇。质谱采用电喷雾电离（ESI）模式进行离子化，正离子多反应监测模式（MRM）扫描，内标法定量分析。结果血清中8种类固醇激素最低定量限[LLOQ，以信噪比（S／N）≥10为标准]为0．03～0．625 ng／mL；在0．05～50．00 ng／mL范围内线性良好，相关系数（r）均≥0．9980；批内精密度为1．93％～13．81％，批间精密度为4．90％～16．18％，加标回收率为80．0％～130．6％。结论建立了同时测定8种类固醇激素的 ID－HPLC－MS／MS。该法灵敏度高、特异性强、准确且高效，可在10 min 内完成分离和检测，适用于人体血清中类固醇激素的定量分析。

关键词：类固醇激素、血清、稳定同位素稀释、液相色谱、串联质谱

分类号：R446.1(诊断学)

在线出版日期：2015-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：427-432