10.3969/j.issn.1673-8640.2015.05.004
液相色谱-串联质谱法测定尿酸及与常规检测方法的比较
目的:建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血清尿酸的方法,并与临床常规生化方法进行比较,为临床实验室不同检测系统尿酸检测结果的一致性提供参考。方法血清添加同位素内标尿酸-15 N2,经乙腈处理吹干重组后采用 LC-MS/MS 测定。以 Capcell C18 MGⅢ为分析柱进行反相色谱分离,以5 mmol/L 乙酸铵+0.1%乙酸水溶液和甲醇(90∶10,v/v)为流动相,等度洗脱,流速0.3 mL/min,电喷雾离子化串联四极杆质谱,负离子多反应监测,尿酸离子通道为167/124 amu(定量)、167/96 amu(定性);尿酸-15 N2离子通道为169/125 amu。LC-MS/MS 进行方法学评价后与临床尿酸常规检测方法(酶紫外法和酶比色法)进行比较。结果 LC-MS/MS 检测尿酸的线性范围为30~952μmol/L,批内和批间精密度分别为2.01%~6.23%和4.55%~8.08%,准确度为96.5%~103.4%。尿酸的色谱保留时间为1.5 min,单份样品的分析时间为3 min。酶紫外法、酶比色法与LC-MS/MS 的平均偏差分别为-10.02%、-9.88%;线性相关方程分别为 Y酶紫外法=0.898XLC-MS/MS +2.15,r =0.978;Y酶比色法=0.845XLC-MS/MS +22.15,r =0.983。 LC-MS/MS 与美国标准技术研究所(NIST)定值参考物质的平均偏差为1.56%±0.65%,与卫生部临床检验中心2014年代谢物正确度验证样品的定值的偏差为-0.34%~3.05%。结论采用 LC-MS/MS 可简便、准确地定量检测尿酸。酶紫外法、酶比色法的血清尿酸测定结果与LC-MS/MS 具有较好的可比性。
尿酸、液相色谱-串联质谱法、尿酸酶紫外法、尿酸酶比色法
R446.1(诊断学)
上海市徐汇区卫生与计划生育委员会科研基金资助项目SHXH201301
2015-06-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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