荧光恒温扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立与评价

摘要：

目的：利用荧光恒温扩增（SAT）技术建立一种快速可靠的肠道病毒71型（EV71）检测方法。方法通过设计特异性的 EV71 RNA 扩增引物及优化探针技术，使用 M-MLV 反转录酶及 T7 RNA 多聚酶对 EV71 RNA进行核酸扩增，同时利用荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪进行实时的荧光信号收集和检测。检测复旦大学附属儿科医院儿童手足口病患儿粪便样本199例，以 EV71型核酸检测试剂盒作参比方法，DNA 测序为第三方验证方法，对研究数据进行 Kappa 一致性分析。结果SAT 技术共检测到119例 EV71阳性样本，其中21例荧光探针法检测为阴性，经测序证实20例样本仍为阳性。SAT 与荧光探针法检测结果的 Kappa 值为0．789。SAT 方法的敏感性100％、特异性98．77％。结论本研究建立的 EV71型 RNA SAT 技术具有敏感性高、特异性强、准确、快速可靠等优点，适用于临床对 EV71感染的快速诊断。

关键词：肠道病毒 71 型、荧光恒温扩增技术、手足口病、敏感性、特异性

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：上海市公共卫生优秀学科带头人计划GWDTT201221

在线出版日期：2014-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1115-1119