多重RT-PCR联合毛细管电泳法检测BCR-ABL融合基因

摘要：

目的：建立多重逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）联合毛细管电泳法检测BCR-ABL融合基因，以期应用于慢性粒细胞白血病（CML）辅助诊断。方法采用重叠延伸法构建BCR-ABL融合基因阳性模板，设计并优化检测BCR-ABL融合基因的多重RT-PCR联合毛细管电泳体系，对检测体系进行初步的性能评估。结果多重RT-PCR技术检测BCR-ABL融合基因（e1a2、e13a2和e14a2）的最低检测限在102～103拷贝/μL；50例临床确诊CML的患者应用该法检测BCR-ABL融合基因的阳性率为86．0％，其中e13a2型（20．0％），e14a2型（66．0％）；本方法与骨髓细胞培养染色体核型分析相比，阳性符合率为97．6％，阴性符合率为75．0％，总符合率为94．0％，2种方法具有较高的一致性（Kappa＝0．765，P＞0．05）。结论成功建立检测BCR-ABL融合基因的多重RT-PCR联合毛细管电泳方法。该方法操作简单快捷、特异性好、灵敏度高，适合于临床上CML的辅助诊断和分子分型。

关键词：BCR-ABL融合基因、慢性粒细胞白血病、多重RT-PCR、毛细管电泳

分类号：Q503(一般性问题)

资助基金：福建省自然科学基金计划资助项目2012J01414；厦门市科技局计划项目资助课题3502Z20113013

在线出版日期：2014-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：226-232