基于纳米技术的芯片电泳快速检测脂蛋白及其亚型的研究

摘要：

目的 建立芯片电泳分离血清脂蛋白及其亚型的方法并初步探讨其临床应用价值.方法 利用自制的微流控芯片,选择Tricine缓冲液作为电泳缓冲液,纳米金作为添加剂,分离经硝基苯并嗯二唑-C6-酰基鞘胺醇(NBD C6-ceramide)预染的脂蛋白,激光诱导荧光技术检测.探讨不同颗粒大小、不同浓度的纳米金对脂蛋白分离的影响,选择最佳的电泳条件；确定芯片电泳分离血清脂蛋白的线性范围、检测限和重现性；采用芯片电泳分析35例冠心病(CHD)患者与30名健康体检者(对照组)的血清脂蛋白.结果 在缓冲液中添加20 nmol/L 5 nm纳米金,大而轻低密度脂蛋白(lLDL)、小而密低密度脂蛋白(sdLDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)在3 min内实现基线分离；在优化的分离条件下,lLDL、sdLDL、VLDL和HDL芯片电泳的线性范围[信噪比(S/N)=3]分别为0.01 ～0.8、0.04 ～1.0、0.04～1.0、0.02～0.8 mg/L;检出限分别为5、5、15和8μg/L.对健康体检者的血清样本连续测定5次,lLDL、sdLDL、VLDL和HDL的峰面积相对标准偏差(RSD)为分别3.5％、2.2％、4.5％、3.9％.CHD组sdLDL与VLDL水平增高,HDL水平降低,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01、P＜0.001).结论 基于纳米技术的芯片电泳可快速、简便地测定脂蛋白及其亚型,对评价CHD的危险因素,实现对CHD的早期检测、预防及有效制定CHD防治策略具有重大意义.

关键词：脂蛋白、纳米金、芯片电泳、冠心病

所属期刊栏目：28

分类号：Q513(蛋白质)

资助基金：中国国家基础研究发展计划973计划,2007CB936104;江苏省社会发展基金资助项目BE 2010697;扬州大学临床医学院资助项目yzucms 201041

在线出版日期：2013-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：225-228