乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建

摘要：

目的 构建含有乙型肝炎病毒(HBV)X基因的真核表达载体,并对其表达进行鉴定.方法 用聚合酶链反应(PCR)方法扩增X基因序列,对pcDNA6(+ )载体及X基因PCR产物双酶切并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定,构建HBV X基因真核表达载体pcDNA6(+ )-HBx.以多聚乙烯酰胺(PEI)法将其转染到HepG2细胞,Western Blot鉴定目的 蛋白.结果 pcDNA6-HBx酶切后,琼脂糖电泳可见到HBx基因片段,经序列测定其含有完整的X基因片段;Western Blot结果显示pcDNA6(+ )-HBx能在HepG2细胞中表达X蛋白.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA6(+)-HBx,并能在HepG2细胞中表达X蛋白,为进一步研究HBV X基因与慢性乙型肝炎及肝癌的关系提供便利条件.

关键词：乙型肝炎病毒、X基因、真核表达

所属期刊栏目：27

分类号：Q503(一般性问题)

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：921-924