10.3969/j.issn.1673-8640.2012.02.013
同型半胱氨酸对THP-1单核细胞源性泡沫细胞形成中ABCA1、ACAT1表达的影响
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对THP-1单核细胞源性泡沫细胞形成中三磷酸腺苷-结合转运子A1( ABCA1)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT1)表达的影响.方法 将THP-1单核细胞与佛波酯(PMA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共同培养,复制泡沫细胞模型,并分别用50、100、200、500 μmol/L Hcy和100μnol/L Hcy+叶酸+维生素B12( Vit B12)干预72 h,并设对照组(不加入Hcy).采用油红0染色检测泡沫细胞的形成.采用酶终点法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)含量的变化,观察Hcy对泡沫细胞CE流出的影响.采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定ABCA1、ACAT1 mRNA表达;免疫印迹法检测ABCA1、ACAT1蛋白表达.结果 油红O染色显示Hcy加剧了泡沫细胞的形成,但不呈量效关系.实验组(加入50、100、200、500 μmol/L Hcy和100 μmol/L Hcy+叶酸+Vit B12)泡沫细胞阳性百分率均高于对照组(P<0.05、P<0.01),以100 μmol/L Hcy组效应最为明显(P<0.01).在Hcy的干预下,泡沫细胞胞内TC、FC、CE流出减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),以100 μmol/L Hcy组效应最为明显(P<0.01).100μmol/L Hcy+叶酸+VitB12组与100.μmol/L Hcy组比较,前者泡沫细胞形成减少,胆固醇流出增多.RTPCR结果显示ABCA1 mRNA表达下调,ACAT1 mRNA表达上调,均以100 μmol/L Hcy组效应最为明显(P<0.01);免疫印迹法检测ABCA1、ACAT1蛋白的表达与其mRNA表达一致.结论 Hcy下调了ABCA1的表达,上调了ACAT1的表达,促使了泡沫细胞形成.
同型半胱氨酸、三磷酸腺苷-结合转运子A1、酰基辅酶A、胆固醇酰基转移酶
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R446.1(诊断学)
国家自然科学基金资助项目30960124;2010年教育部新世纪优秀人才计划NCET-10-0916;宁夏医科大学2010大学生创新性实验获批项目2011 [42]
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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