双尾彗星实验检测精子DNA完整性的方法学建立

摘要：

目的 建立双尾彗星实验检测精子DNA完整性的方法学,并分析精子DNA损伤的类型.方法 利用中性和碱性双相单细胞凝胶电泳技术检测精子DNA损伤的情况.结果 双尾彗星实验共得到9种彗星形态,分别代表9种精子DNA损伤类型.利用H2O2和限制性内切酶AluI分别诱导单链DNA和双链DNA的产生.随着H2O2浓度逐渐增加,单链DNA的断裂逐渐增多,显微镜下可见含Y轴彗星尾的精子数逐渐增多,差异有统计学意义(P＜0.05).同样,随着AluI消化时间的延长,双链DNA的断裂增多,显微镜下可见含X轴彗星尾的精子数增多,差异有统计学意义(P＜0.05).另外,我们还发现男性不育组和有正常生育能力组的DNA单链损伤碎片指数(SSB-DFI)差异无统计学意义,而男性不育组的DNA双链损伤碎片指数(DSB-DFI)却显著高于正常生育能力组(P＜0.05).结论 双尾彗星实验能够区分精子DNA损伤是单链损伤还是双链损伤,为评估男性的生育能力提供更加深入、有力的实验室依据.

关键词：双尾彗星实验、SSB、DSB、男性不育

所属期刊栏目：27

分类号：R446.11(诊断学)

资助基金：浙江省中医药科技计划项目2010ZA110;宁波市科技局农发创新基金项目2010C9104

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25