高效液相色谱-荧光法同时测定血清中的色氨酸和酪氨酸

摘要：

目的建立一种高效液相色谱(HPLC)-荧光法(FD)同时测定血清色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)的方法.方法色谱条件:Megres C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,内径为5 μm),流动相为10%乙腈溶液,流速为1.2 mL/min,Tyr和Trp的荧光检测激发波长和发射波长分别为λexTyr＝228 nm、λexTrp＝285 nm和λemTyr＝306 nm、λemTrp＝353 nm.血清样本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样进行分析测定.且对样本的保存方法进行了探讨.结果 Tyr的保留时间为3.4 min,线性范围为0.275～275 μmol/L,最低检出浓度为0.004 μmol/L,回收率为90.5%～108.8%.Trp的保留时间为7.6 min,线性范围为0.490～196 μmol/L,最低检测浓度为0.005 μmol/L,回收率为88.8%～97.2%.Tyr和Trp的日内、日间测定的相对标准偏差均<5%,苯丙氨酸、5-羟色胺、犬尿喹啉酸、犬尿氨酸和肌酐等物质对该法均无干扰.样本应-20℃冰冻保存.结论 该方法简便、快速、敏感、特异,可同时测定血清Tyr和Trp,适合于临床和科研应用.

关键词：色氨酸、酪氨酸、高效液相色谱法、荧光检测

所属期刊栏目：25

分类号：Q517(蛋白质)

资助基金：湖南省科技计划项目05SK3026;湖南省医药卫生科研计划资助项目C2005019

在线出版日期：2010-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：756-760