甲基化特异性PCR全程易出现的问题与控制措施

摘要：

@@ DNA甲基化是高等脊椎动物生物体内酶介导的化学修饰过程,其影响着基因的转录表达,与肿瘤发生有着密切的联系.DNA甲基化改变是肿瘤发生的一个关键因素,也是肿瘤抑制基因的失活方式之一,它通过基因遗传机制和基因表遗传学机制导致细胞增殖和分化的相关基因表达异常,造成细胞失去正常的基因调控作用而发生恶变形成肿瘤.而目前对DNA甲基化状态的检测方法不多,甲基化特异聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)是一种快速敏感的基因甲基化分析方法[1].其可以检测1/1 000等位基因发生甲基化的肿瘤细胞,特异性近于100%.该法灵敏度高,可以进行超微量分析和同源基因分析;检测到的CpG位点不仅仅局限于限制性酶切位点;无假阳性结果;可用于石蜡包埋样品的分析.但其实验过程有许多因素可导致其失败,我们为此作了总结并给出相关控制措施.

关键词：甲基化、聚合酶链反应、修饰、质量、控制措施

所属期刊栏目：21

分类号：Q503(一般性问题)

在线出版日期：2006-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：437-438