10.3969/j.issn.1673-8640.2001.03.016
凝胶图像处理系统定量检测乙型肝炎病毒DNA
目的建立一种聚合酶链反应(PCR)-凝胶图像处理系统定量分析核酸扩增产物的方法。方法 1.用PCR荧光定量分析仪实时监测PCR扩增曲线,并选择合适的扩增循环次数; 2.将梯度标准乙型肝炎病毒(HBV)阳性血清(101~106拷贝/μl)分别进行40,35及32次循环次数的扩增,经琼脂糖电泳进行凝胶分析; 3.选择凝胶分析软件中能客观反映核酸实际含量的最适参数,制定标准曲线。结果 40及35次循环时,在101~104拷贝/μl线性良好,而在104,105及106拷贝/μl 3个梯度时直线上升缓慢,趋于平坦。32次循环时,10拷贝/μl未能检出,102~106拷贝/μl的5个梯度的模板(对数值)与产物(体积)有良好的线性关系(r=0.97)。结论 32次循环线性范围较广,为最适循环次数;在UVI band的吸光度定量分析指标中,以体积或体积百分比作为定量指标较好。
荧光定量聚合酶链反应、凝胶成像分析、核酸扩增产物、乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸
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R446.61(诊断学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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