NIN1结合蛋白1激活人Src原癌基因调控前列腺癌细胞生物学特性的研究
目的 探讨 NIN1结合蛋白1(NOB1)对前列腺癌细胞生物学特性的影响及其作用机制.方法 采用实时定量 PCR和 Western印迹法检测常见前列腺癌细胞 22RV1,PC-3 、DU145 、LNCap 中 NOB1的表达量;构建 NOB1干扰慢病毒,转染前列腺癌细胞 PC-3 、DU145,并检测干扰效率.采用 MTT法检测敲低 NOB1后前列腺癌细胞 PC-3和 DU145增殖活性,应用流式细胞技术检测敲低 NOB1后前列腺癌细胞 PC-3和 DU145周期,采用 Transwell实验检测转染 NOB1干扰慢病毒后前列腺癌细胞 PC-3和 DU145的侵袭能力.检测敲低NOB1后的人 Src原癌基因(c-Src)磷酸化水平.结果 恶性程度较高的前列腺癌细胞 22RV1,PC-3 、DU145 的NOB1mRNA相对表达量均显著高于恶性程度较低的前列腺癌细胞 LNCaP(P值均＜0.05);前列腺癌细胞22RV1 、PC-3,DU145 的 NOB1蛋白质相对表达量均显著低于前列腺癌细胞 LNCaP(P值均＜0.05).在 NOB1表达量较高的前列腺癌细胞 PC-3和 DU145中转染 NOB1干扰慢病毒(Lv-shNOB1,敲低组)和空白对照慢病毒(Lv-shCtrl,阴性对照组)以构建 NOB1敲低模型,PC-3 、DU145细胞的敲低组NOB1 mRNA相对表达量均显著低于空白对照组(不转染病毒)和阴性对照组(P值均＜0.05),表明构建慢病毒介导 NOB1稳定敲低前列腺癌细胞 PC-3和 DU145.PC-3,DU145细胞的敲低组 NOB1蛋白质相对表达量均显著低于空白对照组和阴性对照组(P值均＜0.05).实验第 3 、4 、5 天,PC-3 、DU-145细胞敲低组 A595值均显著低于阴性对照组同时间(P值均＜0.05.PC-3和 DU145细胞阴性对照组的 GO/G1期细胞百分比均显著低于敲低组(P值均＜0.05),S期细胞百分比均显著高于敲低组(P值均＜0.05),PC-3,DU145细胞敲低组的迁移细胞数均显著低于阴性对照组和空白对照组(P值均＜0.01),PC-3 、DU145细胞敲低组 c-Src(tyr416位点)的磷酸化半定量均显著低于阴性对照组(P值均＜0.01).结论 敲低 NOB1可能通过抑制c-Src的磷酸化来降低前列腺癌细胞的增殖和侵袭能力.
前列腺肿瘤、基因、Src、NIN1综合蛋白1
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R73;R329.26;S828.91
上海市卫生计生委科研项目20154Y0085
2020-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
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