缺氧-复氧对H9c2心肌细胞自噬和线粒体缝隙连接蛋白43的影响及其相互作用
目的 探究心肌细胞系H9c2在缺氧-复氧(H/R)后自噬与线粒体缝隙连接蛋白43 (Cx43)的变化,以及两者间的相互关系.方法 通过缺氧处理12h、复氧处理12h建立H9c2细胞H/R模型.将H9c2细胞随机分为5组:对照组、H/R组、格尔德霉素(GA)组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、GA+3-MA组.应用线粒体膜电位检测试剂盒检测各组线粒体膜电位,细胞计数试剂盒(CCK-8法)检测各组细胞活力,采用Western印迹法检测各组Beclin-1、LC3B、线粒体Cx43和磷酸化Cx43(p-Cx43)的蛋白质水平;应用电子显微镜观察各组自噬体情况.结果 H/R组的细胞活力显著低于对照组(P＜0.01),乳酸脱氢酶(LDH)水平显著高于对照组(P＜0.01),H-R模型建立成功.H/R组的线粒体膜电位、细胞活力均显著低于对照组(P值均＜0.05);GA组、3-MA组和GA+3-MA组的线粒体膜电位、细胞活力为均显著低于H/R组(P值均＜0.05);GA+ 3-MA组线粒体膜电位、细胞活力均分别显著低于GA组和3-MA组(P值均＜0.05).H/R组自噬相关蛋白质Beclin-1水平和LC3BⅡ/LC3BⅠ分别为0.89±0.05和4.37±0.50,均显著高于对照组的0.26±0.03和0.77±0.09(P值均＜0.05);与H/R组相比,GA组、3-MA组和GA+3-MA组的Beclin-1水平(0.75±0.06、0.47±0.03、0.31±0.02)、LC3BⅡ/LC3BⅠ(3.29±0.18、1.37±0.09、0.85±0.14)均显著降低(P值均＜0.05);GA+3-MA组的Beclin-1水平、LC3BⅡ/LC3BⅠ又显著低于GA组和3-MA组(P值均＜0.05).H/R组线粒体Cx43和p-Cx43蛋白质水平分别为0.75±0.03和0.41±0.03,均显著低于对照组的0.86±0.02和0.58±0.01(P值均＜0.05);GA组、3-MA组和GA+3-MA组的线粒体p-Cx43蛋白质水平分别为0.27±0.06、0.33±0.05、0.18±0.04,均显著低于H/R组(P值均＜0.05);GA组和GA+3-MA组的线粒体Cx43蛋白质水平(0.62±0.09、0.59±0.07)均显著低于H/R组(P值均＜0.05);GA+3-MA组的线粒体p-Cx43蛋白质水平显著低于GA组和3-MA组(P值均＜0.05).结论 H/R引起的线粒体Cx43含量下降和脱磷酸化增加可能是缺血-再灌注损伤发生的重要机制.自噬参与线粒体Cx43磷酸化状态的维持,线粒体Cx43特别是p-Cx43也参与了自噬的激活过程,对H/R心肌起保护作用.
肌细胞、心脏、自噬、缺氧-复氧、线粒体Cx43
42
R542.2;R285.5;R322.11
湖北省卫生和计划生育委员会联合基金项目WJ2018H0068
2019-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
391-396
