慢病毒介导的过表达microRNA-663a对膀胱癌细胞功能学的影响
目的 探讨负载microRNA-663a(miR-663a)的慢病毒上调miR-663a对膀胱癌EJ和5637细胞系功能学的影响.方法 将负载过表达miR-663a的慢病毒转染人膀胱癌EJ和5637细胞系.EJ和5637细胞系各设干扰组、阴性对照组和空白对照组,转染72 h后置于荧光显微镜下观察转染效率,采用实时定量PCR法检测miR-663a的表达量,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测膀胱癌细胞增殖生长情况,通过细胞划痕实验检测膀胱癌细胞迁移能力,通过Transwell小室侵袭实验检测膀胱癌细胞侵袭能力.结果 EJ和5637细胞系中,干扰组的miR-663相对表达量均显著高于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05),空白对照组的miR-663a相对表达量与阴性对照组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05).EJ细胞系转染miR-663a后第4、5天,干扰组D值显著低于阴性对照组和空白对照组同时间(P值均<0.05);5637细胞系转染miR-663a后第3、4、5天,干扰组D值显著低于阴性对照组和空白对照组同时间(P值均<0.05).EJ和5637细胞系中,干扰组细胞培养48 h时的闭合率均显著低于空白对照组和阴性对照组同时间(P值均<0.05).EJ和5637细胞系中,干扰组Transwell小室滤膜下表面细胞数均显著低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05).结论 miR-663a体外可显著抑制膀胱癌EJ和5637细胞系的细胞增殖、迁移和侵袭能力,为miR-663a可能成为膀胱癌的治疗新靶点提供了实验依据.
慢病毒、膀胱癌、EJ和5637细胞系、microRNA-663a
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2015-09-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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