腺病毒介导人受体活性修饰蛋白-1修饰骨髓间充质干细胞移植对兔心肌梗死后心肌新生血管形成的影响
目的 应用人受体活性修饰蛋白-1 (hRAMP1)修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)兔模型,观察基因修饰干细胞移植对AMI后兔新生血管及心功能的影响.方法 采用密度梯度离心结合贴壁法培养兔MSCs,取第3～5代MSCs用于实验.应用带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的hRAMP1重组腺病毒载体和空病毒载体转染MSCs,建立AMI兔模型,随机分为hRAMP1转染MSCs移植组(hRAMP1-MSCs组)、空病毒转染MSCs移植组(MSCs组)和等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)注射组(对照组),每组12只.模型建立后40 min,经局部注射等体积MSCs悬液或PBS至梗死交界区.MSCs移植后7、14、28 d,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清血管内皮生长因子(VEGF)水平；MSCs移植后28 d,应用超声心动仪检测兔的心脏功能,采用苏木精-伊红(H-E)染色评估心肌病理学改变、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积,采用免疫组织化学染色检测梗死交界区CD31的表达,并计数新生毛细血管密度.结果 流式细胞术测定结果显示,CD29阳性率为95.8％,CD90为98.6％,CD45为12.5％.MSCs移植后7、14、28 d,hRAMP1-MSCs组的血清VEGF水平均又显著高于MSCs组和对照组(P值均＜0.05),MSCs组又显著高于对照组(P值均＜0.05).MSCs移植后28d,hRAMP1-MSCs组的心肌纤维化程度、心肌梗死面积均显著小于MSCs组和对照组(P值均＜0.05),MSCs组又显著小于对照组(P值均＜0.05).MSCs移植后28 d,3组梗死交界区均有CD31表达,hRAMP1-MSCs组新生毛细血管密度显著高于MSCs组和对照组(P值均＜0.05),MSCs组又显著高于对照组(P＜0.05).结论 hRAMP1基因修饰MSCs移植较MSCs移植更能增加梗死交界区心肌新生血管密度,改善梗死后心脏的功能.
心肌梗死、间充质干细胞、受体活性修饰蛋白-1、血管形成、心功能
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R73;R39
国家自然科学基金NSFC 81060014;贵州省麻醉与器官保护基础研究重点实验室专项资金黔科合技工字[2011]4006
2012-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
699-703,前插2
