B细胞淋巴瘤/白血病基因2在颅脑外伤后抗神经元凋亡作用
目的 通过研究B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)高表达转基因小鼠和对照小鼠颅脑打击后神经元凋亡的差异,探寻Bcl-2抗凋亡及减轻颅脑损伤的作用.方法 将构建的Bcl-2质粒转入C57BL/6J×CBA杂交小鼠的受精卵,培育得到携带Bcl-2的小鼠.Bcl-2转基因小鼠9只作为实验鼠,采用随机数字法分为实验1d组、实验7d组和实验14 d组,每组3只.同窝非转基因小鼠9只作为对照鼠,采用随机数字法分为对照1d组、对照7d组和对照14d组,每组3只.采用液压打击法中侧方液压打击的方法,以中等打击力致小鼠中等颅脑外伤.余下3只同窝非转基因小鼠为假手术组,仅打开椎板,暴露硬脊膜,不予打击.分别于术后1、7、14 d处死小鼠,取脑组织切片行苏木精-伊红(H-E)染色,观察神经元变化；采用原位末端标记法(TUNEL)染色计数TUNEL标记的阳性细胞数即凋亡神经元,并计算TUNEL染色切片的积分光密度(IOD)值.结果 经聚合酶链反应及Western印迹法检测证明所培育的转基因小鼠为Bcl-2高表达的小鼠.假手术组小鼠脑细胞未见明显变化.实验鼠和对照鼠的脑组织都有出血,结构被破坏,实验鼠的损伤肿胀及出现核固缩或解离的神经元数量少于对照鼠.假手术组小鼠的脑组织未见明显的凋亡神经元细胞.实验鼠和对照鼠的脑组织标本可见TUNEL染色阳性细胞,随时间的推移逐渐增多,在损伤后7d达到高峰,然后稳定并逐渐减少.实验1d组、实验7d组、实验14 d组小鼠的每个光学显微镜高倍镜视野内的TUNEL阳性神经元数(P值分别为0.042、0.039、0.033)和TUNEL染色切片的IOD值(P值均为0.000)均分别显著少于对照1d组、对照7d组、对照14 d组.结论 Bcl-2蛋白是中枢神经系统内在的重要的抗凋亡因子,高表达Bcl-2能够抑制颅脑损伤后神经元的凋亡,从而减轻大脑的损害.
颅脑损伤、白血病基因2、神经元凋亡、侧方液压冲击、转基因小鼠
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R73;R74
上海市浦东新区社会发展局科研基金资助项目PW08-7
2012-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
592-596,前插2
