My027融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌的表达

摘要：

目的 探索My027蛋白的体外表达,通过原核表达获得大量可溶性My027融合蛋白. 方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027.转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法获得融合蛋白,采用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、Western印迹法及质谱进行鉴定. 结果 融合蛋白以水溶形式分泌于大肠杆菌BL-21胞质中,纯化后的目的蛋白经SDS-PAGE、Western印迹法及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确. 结论 人脂肪细胞新蛋白My027在pGEX-4T-2原核表达载体可获高效表达,为进一步研究其功能奠定基础.

关键词：蛋白My027、融合蛋白、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：TQ4;R69

资助基金：973项目及863项目子课题2002BA711A05;上海市重点学科建设Y0204

在线出版日期：2008-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：739-742,封底