兔外周血内皮祖细胞的培养与鉴定

摘要：

目的 研究兔外周血内皮祖细胞(EPCs)的分离和定向培养的方法,并对其功能进行鉴定.方法 从兔股静脉插管抽取静脉血20 mL,采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心法分离单个核细胞,接种于人纤连蛋白包被的培养板上,分别予含血管内皮生长因子(VEGF)20 ng/mL或内皮细胞生长添加剂(ECGS)30 μg/mL的M199培养基培养.培养2周后进行免疫荧光染色鉴定内皮祖细胞.结果 每毫升外周血可分离1×106～2×106个单个核细胞,两组均于接种后第2～3天细胞胞体增大,有的呈多边形或梭形;第4天出现条带或栅栏状分布;第7～8天梭形细胞增多;第14天左右出现细胞集落,其特点是中央为圆形细胞,外周是梭形细胞;添加VEGF的培养基组每接种5×105个单个核细胞出现5～10个细胞集落,而添加ECGS者出现8～15个.第4周,添加VEGF的培养基组的细胞开始脱落而死亡,而添加ECGS的细胞仍持续稳定生长,呈铺路石样分布.两组在荧光显微镜下均可见双阳性的EPCs,血管性假性血友病因子(vWF)染色阳性.结论 采用VEGF和ECGS均可体外培养兔外周血内皮祖细胞,且均能使其诱导分化为内皮样细胞,而ECGS较VEGF诱导效果更佳.

关键词：内皮祖细胞、内皮细胞、血管内皮生长因子、内皮细胞生长添加剂

所属期刊栏目：30

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2007-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：53-55,封底