鼠、人源巨噬细胞源性泡沫细胞模型的建立及比较

摘要：

目的 建立鼠、人源巨噬细胞源性泡沫细胞模型并比较其生物学特征.方法 体外培养鼠源RAW264.7和人源THP-1巨噬细胞,经氧化型低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)刺激后,油红O染色,于荧光倒置显微镜下观察泡沫细胞形态及脂质富集情况.采用qRT-PCR技术检测ox-LDL对细胞内炎性因子表达的影响;流式细胞术检测ox-LDL对细胞凋亡的影响;酶标仪分别检测ox-LDL对细胞内脂质过氧化标志物活性氧(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平的影响;HPLC检测ox-LDL对鼠、人源巨噬细胞内催化色氨酸沿犬尿氨酸途径(kynurenine pathway,KP)分解代谢的限速酶吲哚胺2,3-双加氧化酶1 (indoleamine 2,3 dioxygenase 1,IDO1)活性的影响.结果 鼠源RAW264.7和人源THP-1巨噬细胞经ox-LDL处理后,大量脂质在细胞内富集沉积,形成泡沫细胞.ox-LDL既可诱发巨噬细胞内炎性因子高表达,也会引起ROS和MDA水平显著升高,表明ox-LDL可以诱导鼠源RAW264.7和人源THP-1巨噬细胞内炎症反应和脂质过氧化产生.ox-LDL更容易引发人源THp-1巨噬细胞的凋亡,而对鼠源RAW 264.7巨噬细胞凋亡却无明显影响.ox-LDL在鼠源RAW264.7和人源THP-1巨噬细胞中均可激活KP.结论 鼠源RAW 264.7和人源THP-1巨噬细胞均可通过ox-LDL处理来建立稳定的鼠、人源巨噬细胞源性泡沫细胞模型.

关键词：泡沫细胞、RAW264.7、THP-1、炎症因子、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、吲哚胺2、3-双加氧化酶1(IDO1)

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分类号：R543(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家重点研发计划2016YFC1303503;上海市生物医药重点课题17431902200,18431902600

在线出版日期：2019-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：445-453