10.3969/j.issn.1672-8467.2018.04.004
2-甲氧雌二醇对低氧条件下皮肤成纤维细胞自噬水平及纤维化的影响
目的 研究2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对低氧条件下人皮肤成纤维细胞自噬水平及纤维化的影响.方法 原代培养健康人皮肤成纤维细胞并传代,取第3~6代细胞,在低氧(1% O2)条件下培养.使用2-ME(0、5、10、25μmol/L)和自噬抑制剂Bafilomycin A1(0、5、10、50 nmol/L)干预,采用Western blot法检测I型胶原(collagen type I)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、低氧诱导因子-1a(hypoxia-inducible factor 1alpha,HIF-1a)、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)及P62的水平,采用免疫荧光法检测LC3的水平.结果 成纤维细胞低氧培养24 h后,HIF-1a、Ⅰ型胶原、CTGF和LC3Ⅱ蛋白质水平显著升高,P62蛋白质水平降低,LC3免疫荧光信号显著增强.Bafilomycin A1干预组成纤维细胞I型胶原和CTGF水平降低,HIF-1α、LC3Ⅱ和P62水平升高,LC3免疫荧光信号增强,该效应呈浓度依赖性.2-ME干预组成纤维细胞HIF-1a、Ⅰ型胶原、CTGF和LC3Ⅱ蛋白质水平降低、P62蛋白质水平升高,LC3免疫荧光信号减弱,该效应呈浓度依赖性.结论 低氧条件下2-ME通过下调细胞自噬抑制皮肤成纤维细胞纤维化.
2-甲氧雌二醇、低氧、成纤维细胞、纤维化、自噬
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R751(皮肤病学与性病学)
国家自然科学基金30901291
2018-08-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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