基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

摘要：

目的 建立一种同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸浓度的高效液相色谱(HPLC)法,用于评价小鼠给予IDO抑制剂后体内IDO活性.方法 血清用6％高氯酸沉淀蛋白法处理,离心后取上清进样,采用标准加入法定量.选用ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-醋酸钠(15mmol/L,冰醋酸调pH至4.0),流速1.1 mL/min,柱温30℃,犬尿氨酸和色氨酸的紫外检测波长分别为360 nm和280 nm.结果 犬尿氨酸保留时间为6.10 min,线性范围为0.25～10 μ mol/L,检测限为0.09 μmol/L;色氨酸保留时间10.12 min,线性范围为25～1 000 μmol/L,检测限为0.25μmol/L.精密度、回收率及稳定性等均符合生物样品定量分析方法验证指导原则的要求,并成功应用于62只小鼠血清犬尿氨酸和色氨酸浓度的测定.结论 建立了一种简单、快速、准确的HPLC分析方法,采用标准加入定量方式,可同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸血药浓度,并成功应用于实际生物样本的测定.

关键词：犬尿氨酸、色氨酸、HPLC、血清、标准加入法、小鼠

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金81373396,81573310;高等学校博士学科点专项科研基金20130071110037This work was supported by the National Natural Science Foundation of China81373396,81573310;the Research Fund of the Doctoral Program of Higher Education of China20130071110037

在线出版日期：2017-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：704-709