鼠源吲哚胺2,3-双加氧酶活性检测方法的建立

摘要：

目的 建立鼠源吲哚胺2,3-双加氧酶(mouse indoleamine 2,3-dioxygenase,mIDO)活性检测方法.方法 利用基因工程方法表达纯化重组mIDO (recombinant mIDO,rmIDO),建立酶水平mIDO活性检测体系;构建过表达mIDO的小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)细胞株,建立细胞水平mIDO活性检测体系.比较L-1-甲基色氨酸(L-1-methyl tryptophan,L-1-MT)在酶及细胞水平上对mIDO及人源IDO (human IDO,hIDO)的抑制作用,测定抑制类型、抑制常数Ki值及半数抑制浓度(IC50)值.结果 L-1-MT对mIDO和hIDO均有抑制作用,抑制类型及抑制常数Ki值相似,但IC50值在酶水平及细胞水平上均有差异.结论 mIDO酶活性检测体系是筛选IDO抑制剂的有效工具,与hIDO酶活性检测体系联用,能反映种属差异,可更好地利用小鼠模型来替代人类进行IDO抑制剂治疗疾病的研究.

关键词：吲哚胺2、3-双加氧酶、鼠源、人源、活性检测体系、L-1-甲基色氨酸

所属期刊栏目：43

分类号：Q331;Q786(人工选择与自然选择)

资助基金：国家自然科学基金81373396;高等学校博士学科点专项科研基金20130071110037;上海市科委生物医药重点课题12431900204;the National Natural Science Foundation of China81373396;the Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education of China20130071110037;the Key Medical Project of Science and Technology Commission of Shanghai Municipality12431900204

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：350-356