类胰蛋白酶通过PAR2激活JAK-STAT通路促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1表型转换

摘要：

目的 研究类胰蛋白酶促进小鼠巨噬细胞表型转换的作用及其机制.方法 体外分离培养小鼠巨噬细胞(对照组),并诱导为M1和M2亚型,经类胰蛋白酶和PAR2激动剂分别作用后,通过real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞亚型标志物以及JAK STAT信号通路的变化.结果 成功分离培养小鼠骨髓来源的巨噬细胞,并诱导其分化为M1和M2亚型.PAR2激动剂(2-Furoyl LIGRLO-amide)和类胰蛋白酶分别与M1型巨噬细胞分别作用后,M1型标记物iNOS和IL-12高于对照组,而M2型标记物arg1和mrc1与对照相比无明显变化,提示类胰蛋白酶和PAR2激动剂可以促进巨噬细胞向M1型转化,而不会促进M1型向M2型转化.PAR2激动剂和类胰蛋白酶分别与M2型巨噬细胞作用后,M2型标记物arg1和mrc1明显下降,而M1型标记物iNOS和iL-12有所增加,提示类胰蛋白酶和PAR-2激动剂均可促进M2型向M1型转化.类胰蛋白酶作用于M1型巨噬细胞后,JAK2磷酸化水平、STAT和pSTAT的表达水平均无明显变化.类胰蛋白酶作用于M2型巨噬细胞后,JAK2的磷酸化随着时间延长明显升高,STAT的磷酸化水平同时升高,提示类胰蛋白酶可以通过和PAR-2结合而激活JAK2-STAT信号通路,进而引起M2型向M1型转化.结论 类胰蛋白酶可能通过与其受体PAR2相互作用后激活JAK-STAT通路,促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1亚型转化,起到促进炎症发展的作用,从而进一步加重动脉粥样硬化的发展.

关键词：类胰蛋白酶、PAR2、巨噬细胞M1/M2、JAK-STAT、小鼠

所属期刊栏目：42

分类号：TQ925+.2(其他化学工业)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81270490,81170253;复旦大学上海医学院项目J1210041;the General Project of National Natural Science Foundation of China81270490,81170253;the Project of Shanghai Medical College, Fudan UniversityJ1210041

在线出版日期：2015-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：607-612,627