雌激素水平对大豆苷原(DAI)促成大鼠骨细胞分化作用的影响

摘要：

目的 观察基础雌激素(estrogen)水平对大豆苷原(daizein,DAI)促成骨细胞分化作用的影响.方法 采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,通过培养液中添加17β-雌二醇改变培养微环境(包括空白对照)雌激素水平,应用MTT法和对硝基苯磷酸盐(p-nitropheny-phosate,PNPP)法检测细胞增殖率和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,应用real-time PCR法检测其雌激素受体α(ERa)、雌激素受体β(ERβ)和过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)γ的mRNA水平变化,研究雌激素基础水平变化对DAI促成骨细胞分化作用的影响.结果 培养环境中雌二醇水平升高致DAI的促分化作用减弱.其中100 nmol/L DAI组ALP比活性较对照组的增幅由雌激素补充前的23％分别降至8％(17β-雌二醇为100 pmol/L)和-11％(17β-雌二醇为1 000 pmol/L),显示基础雌激素水平对DAI促分化的拮抗作用.为避免培养液中血清雌激素的可能影响,进一步采用去激素血清培养(含2％去激素胎牛血清).此时补充17β-雌二醇至100 pmol/L,DAI各剂量组细胞ALP比活性较对照组明显增加(16％～21％,P＜0.05).继续补充雌激素至1 000和10 000 pmol/L时,其作用反而减弱.该结果显示,DAI促成骨细胞分化作用与雌激素基础水平有关,低雌激素状态(≤100 pmol/L)可增强其作用.为进一步探索其作用机制,我们初步观察了雌激素(100pmol/L)和DAI(100 nmol/L)单独或联合作用下成骨细胞ERa、ERβ和PPARγ受体表达变化.结果显示,100pmol/L 17β-雌二醇明显上调ERβ表达,并部分抵抗DAI下调ERβ的作用.结论 DAI的促成骨分化作用与基础雌激素水平有关,低雌激素(≤100 pmol/L)状态有利于DAI的促分化作用,而雌激素水平升高可减弱其促分化作用.

关键词：成骨细胞、大豆苷原(DAI)、雌激素、碱性磷酸酶(ALP)、大鼠

所属期刊栏目：42

分类号：R336;R589.5(人体生理学)

在线出版日期：2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：191-197,203