全血培养胞质分裂阻断微核(CBMN)实验方法的改进

摘要：

目的 改良全血培养胞质分裂阻断微核(cytokinesis-bloek micronucleus,CBMN)实验制片法及探讨细胞松弛素B(cytochalasin B,cyt-B)的最佳浓度.方法 依据常规微核试验制片法,在低渗液的温度、固定液比例和操作手法等方面改进实验方法;设置不同浓度cyt-B组(4、5、6、7 μg/mL),常规外周血淋巴培养至44 h加入cyt-B,继续培养至68 h或72 h,收获细胞.按人类微核计划(HUMN Project)中的识别标准识别双核、多核细胞和微核(micronuclei,MN),确定cyt-B最适浓度,并分析cyt-B对自发微核率的影响.结果 改良法所获的双核淋巴细胞的胞膜完整,边界清晰,微核易于辨认.培养72 h后,cyt-B浓度≥5μg /mL时,双核细胞比例较4 μg/mL组显著增加(P=0.001);cyt-B浓度≥6μg/mL时,三核以上细胞比例显著增加(P =0.01).培养68 h后,cyt-B浓度为6μg/mL时,双核细胞比例较高(58.4％).各浓度组淋巴细胞自发微核率的差异无统计学意义(P=0.32).结论 改良法选用cyt-B浓度为5μg/mL、培养72 h或cyt-B浓度为6μg/mL、培养68 h时收获的细胞,可获得大量双核细胞,且胞膜完整,染色清晰;cyt-B对淋巴细胞自发微核率无显著影响.

关键词：胞质分裂阻断微核(CBMN)法、细胞松弛素(cyt-B)、全血培养法、微核(MN)

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分类号：R394.6

资助基金：安徽省自然科学基金青年基金项目1208085QC67;蚌埠医学院自然科学研究项目BY1019This work was supported by the Scientific Research Foundation of Anhui Province China1208085QC67;the Scientific Research Foundation of Bengbu Medical CollegeBY1019

在线出版日期：2014-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：395-399