神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在大鼠小胶质细胞缺氧/复氧模型上的作用

摘要：

目的 探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)是否可以改变组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)对于小胶质细胞(microglia,MG)活化的影响.方法 体外原代培养的大鼠皮层MG并鉴定.建立缺氧-复氧模型并鉴定.首先,使用ELISA试剂盒测定MG在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)状态下自身释放tPA的含量,细胞被分为正常组、PBS对照组和OGD3h复氧不同时间组(1、3、5、7、24 h).其次,研究NSP在MG缺氧/复氧时的作用,本部分实验分3组,分别为缺氧/复氧干预组、tPA干预组及tPA+NSP干预组.以上各组均设3个复孔,实验重复3次.采用倒置相差显微镜直接观察盖玻片上细胞形态学变化,CCK-8法检测各组间细胞增殖率,ELISA试剂盒测定IL-1β和NO含量.结果 MG在H/R时合成tPA,OGD3h复氧3 h时释放量最多.H/R时MG激活,炎性因子IL-1β和NO的释放增多.tPA干预MG后,细胞活化并增殖、IL-1β和NO的释放增多.各NSP预处理组细胞活化、增殖和炎性因子的释放增多均没有tPA或H/R干预组明显.结论 MG在H/R时合成tPA.H/R早期即诱发了MG的活化.tPA可以进一步诱发MG的增殖和活化.H/R和tPA的干预均引起IL-1β和NO的释放.NSP可减轻H/R和tPA干预引起的MG活化和增殖,减少MG中IL-1β和NO的释放.

关键词：小胶质细胞、组织型纤溶酶原激活剂、神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂、缺氧、大鼠

所属期刊栏目：38

分类号：R743(神经病学与精神病学)

资助基金：复旦大学脑科学研究院开放基金项目EYH 2640029

在线出版日期：2011-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：226-232