组织因子途径抑制物-2的时间分辨荧光免疫测定方法的建立及评价

摘要：

目的 建立测定血液中组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway-2,TFPI-2)含量的时间分辨荧光免疫测定方法 (time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA).方法 以兔抗人TFPI-2多克隆抗体作为固相抗体,单克隆抗体3C8作为第一抗体,原核表达的人TFPI-2作为标准品,Eu3+标记的羊抗鼠单克隆抗体作为检测抗体,采用双抗体夹心法建立TFPI-2 TRFIA分析系统,并与酶联免疫吸附法(ELISA)进行比较.结果 自制TFPI-2 TRFIA试剂标准曲线的线性范围为0.1～50 ng/mL,灵敏度为0.048 ng/mL,批内和批间变异系数均≤8.39%.应用该方法 测定56例冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD)患者及24例正常体检者血浆中的TFPI-2分别为(10.58±7.12)和(8.53±2.32)ng/mL.结论 我们建立的TFPI-2 TRFIA分析方法 与 ELISA相比灵敏度更好,定量检测结果 能够敏感准确地反映血液内TFPI-2的浓度变化,特异性和稳定性均符合要求.

关键词：组织因子途径抑制物-2、时间分辨荧光免疫测定、酶联免疫吸附法、冠状动脉粥样硬化性心脏病

所属期刊栏目：38

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金项目30670687

在线出版日期：2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：54-59