10.3969/j.issn.1672-8467.2009.01.003
RNAi沉默Polo-like kinase-1基因表达对大肠癌细胞端粒酶活性的影响
目的 探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响.方法 根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,siRNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平.分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响.结果 所设计的5个siRNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好.以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性.MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4siRNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.05).结论 PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用;以PLK1 siRNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关.
大肠肿瘤、polo-like kinase-1、RNA干扰、小干扰RNA、端粒酶
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R735.3+4(肿瘤学)
镇江市科技计划基金项目SH2006019;中国博士后科学基金项目2003033547
2009-05-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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