大鼠肺移植供肺保存过程中细胞死亡类型的动态变化

摘要：

目的 通过对供肺保存过程中细胞凋亡和细胞坏死的动态变化的研究,探讨建立一种可以准确评估供肺保存质量的实验模型.方法 清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠42只,体重250～300 g,预先分为7组,每组6只.整体获取心肺,置于4℃的新鲜制备的低钾右旋糖酐(LPD)溶液中保存.保存不同的时间(0、2、4、6、12、18、24 h)后,通过主肺动脉向肺内灌注20 mL的500 mmol/L锥虫蓝、20 mL生理盐水和10 mL 4%的多聚甲醛后固定,蜡块包埋后按4 μm层厚切片.在光学显微镜下观察锥虫蓝染色情况;另一方面作TUNEL染色和Hoechst染色,在荧光显微镜下观察,严格按照盲法原则由两位研究者对死亡细胞进行分类计数.结果 随着供肺低温保存时间的延长,细胞死亡数量上逐渐增加,而且细胞的死亡类型上发生动态变化.在低温保存的条件下,4 h组才开始有少量的坏死细胞出现,随着保存时间的逐渐延长,细胞坏死也逐渐增加,在供肺保存18 h以上组,坏死细胞显著增加;而细胞的凋亡开始于供肺保存2 h组,在供肺保存12 h组达到高峰,约占所有细胞的9%,在供肺保存18 h组基本消失.结论 通过对不同保存时间的供肺进行锥虫蓝、TUNEL、Hoechst三染色的方法,能很好的显示供肺保存后的细胞凋亡和坏死的情况.

关键词：移植、供肺保存、凋亡、坏死、锥虫蓝、TdT介导的dUTP缺口末端标记技术

所属期刊栏目：35

分类号：R655.3(外科学各论)

资助基金：上海市重点学科建设项目B116

在线出版日期：2008-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：489-493