化学合成siRNA阻断小鼠骨髓源性不成熟树突状细胞GAPDH基因的表达

摘要：

目的 观察化学合成siRNA在转录后水平降低小鼠不成熟树突状细胞基因表达的效率及其影响因素.方法 体外取小鼠胫骨和股骨的骨髓,分离、培养不成熟树突状细胞,应用化学合成的不同浓度siRNA在LipofectAMINE 2000转染试剂介导下转染树突状细胞,流式细胞仪检测siRNA的转染效率,RT-PCR检测小鼠不成熟树突状细胞中GAPDH mRNA水平的变化,锥虫蓝染色测定各组中培养细胞的存活率.结果 转染终浓度为100～600 nmol/L的siRNA能特异有效地阻断GAPDH基因的表达,而转染终浓度为50～400 nmol/L的siRNA对细胞具有低毒性.结论 siRNA能在不成熟树突状细胞内启动RNA干扰作用,400 nmol/L的siRNA能在特异有效地阻断内源性基因表达的同时,最大限度地保持细胞活力.

关键词：siRNA、树突状细胞、GAPDH、RNA干扰

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分类号：R392.4

资助基金：国家自然科学基金30400428;高等学校博士学科点专项科研项目20030246069;复旦大学校科研和教改项目

在线出版日期：2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：802-806